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保存：-20℃

超低分子量蛋白Marker I用来测定SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量，由3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD～22kD.5条带的大小分别为3.3,5.8,7.8,14.8,22KD。
使用方法：
第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用。
一、制胶
(一)配置分离胶
1、按照表一将不同体积的双蒸水，40%PAA(19：1),4×凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即混匀5～10秒，以使溶液充分混匀。
3、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层，使凝胶表明保持平整。
4、静置30～60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
(二)配置浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去
1、按照表一将不同体积的双蒸水，40%PAA(19：1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即混匀5～10秒，以使溶液充分混匀
3、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4、静置30～60分钟待凝胶聚合。
表一(一块厚度0.75mm凝胶用量)

	分离胶	浓缩胶
	18%T,5%C/6.0mL	5%T,3.3%C/4.0mL
40%PAA(19:1)	2.7mL	/
40%PAA(29:1)	/	0.5mL
4×凝胶缓冲液	1.5mL	1mL
乙二醇(电泳级)	1.8mL	/
ddH2O	/	2.5mL
10%APS	45μL	30μL
TEMED	9μL	6μL

注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间
二、电泳
1、取一管分好的Marker样品，95℃处理5分钟，充分混匀后备用
2、将电泳槽的外槽加入1×阳极缓冲液，内槽加入1×阴极缓冲液，轻柔拨出梳子，将Marker或蛋白样品加入点样孔，80-120V电泳30～60分钟左右，待指示前沿到达离胶上沿时，把电压调至150-200V，至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳，整个电泳过程大约需要2～3小时。(注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽)
表二小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配置

一、1/40%PAA(29：1)(配制浓缩胶) 丙烯酰胺38.67g甲叉双丙烯酰胺1.33g 用ddH2O溶解后定容至100mL，过滤后使用，贮存：4℃	二、40%PAA(19：1)(配制分离胶) 丙烯酰胺38g甲叉双丙烯酰胺2g 用ddH2O溶解后定容至100mL，过滤后使用，贮存：4℃
三、4×凝胶缓冲液(配制凝胶用)[3M Tris 0.3%SDS pH8.45] Tris 182g ddH2O 300mL 1.5gSDS或15mL 10%SDS 用HCl调pH至8.45用ddH2O定容至500mL贮存：4℃	四、10×阳极缓冲液[2M Tris pH8.9]贮存：4℃ Tris 121.1g ddH2O 400mL用HCl调pH值到8.9 用ddH2O定容至500mL注：使用前稀释1×阳极缓冲液使用
五、10×阴极缓冲液(上槽缓冲液)[1M tris 1M Tricine 1%SDS pH8.3] TRIS 60.6g Tricine 89.6g SDS 5g 用ddH2O定容至500mL贮存：4℃	六、2×Tricine蛋白样品上样缓冲液(10mL)1mL 1M Tris-HCl pH6.8 2.4mL甘油0.8g SDS 0.31g DTT 2mg考马斯亮蓝G-250 用灭菌ddH2O定容至10mL混匀分装-20℃贮存备用
七、染色液 冰醋酸100mL考马斯亮蓝G-250 0.25g水900mL	八、脱色液 冰醋酸100mL水900mL

三、染色，根据常规染色
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